幼苗叶色由紫转淡!转录组揭示旱稻花青素积累的分子调控机制

日期:08-21  点击:98  属于:项目文章


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研究背景

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水稻是全球主粮,随着大众健康需求提升,富含花青素的紫叶水稻因抗氧化、观赏、抗逆等多重价值备受关注。花青素作为类黄酮关键产物,既是叶片紫色表型的物质基础,也能提升水稻耐低温、干旱、紫外胁迫能力,紫叶性状还可作为育种直观形态标记,同时助力景观农业发展。目前拟南芥花青素合成通路研究较为成熟,水稻相关合成基因虽已有报道,但幼苗期花青素动态积累的分子调控机制尚不清晰。


2026年6月16日,Agronomy上发表一篇题为“Transcriptome Analysis and Identification of Key Genes Involved in Anthocyanin Biosynthesis in Leaves of Upland Rice Seedlings of Landrace 17SM-19”的研究性文章,该研究以旱地稻地方品种 17SM-19 为材料,测定一叶期(S1)与二叶期(S2)叶片花青素含量,利用转录组测序,筛选差异表达基因并完成 GO、KEGG 富集、系统进化分析,结合qPCR验证测序结果;结果显示S1花青素含量显著高于S2,共鉴定出9865个差异基因,上调4702个、下调5163个,差异基因显著富集于光合作用、核糖体等通路,筛选得到10个花青素合成结构基因与4个调控转录因子,qPCR 证实转录组数据可靠,明确了幼苗叶片花青素随发育降低的分子基础,挖掘出一批花青素合成关键候选基因。



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及因生物为该研究提供转录组测序服务





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研究结果

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1.幼苗不同叶期叶片表型与花青素含量变化


旱地稻 17SM-19 一叶期 S1 叶片紫色更深,二叶期 S2 紫色明显消退,新生叶片几乎无紫色;定量检测显示 S1 花青素含量 43.37 U/g,S2 仅 16.54 U/g,二者差异显著,证明叶片紫色深浅与花青素积累量呈正相关。

 





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2. 两时期转录组测序质量与差异表达基因筛选

样本测序数据量 6.67–7.22 Gb,所有样本 Q30>93%,测序数据质量合格;以 S1 为对照筛选 DEGs,共得到 9865 个差异基因,其中 4702 个上调、5163 个下调,火山图与聚类图直观展示基因整体表达分化情况。



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3. 差异基因 GO、KEGG 功能富集分析

上调 DEGs 显著富集类囊体、光合作用、能量代谢等 GO 条目,光合作用、碳代谢等 KEGG 通路;下调 DEGs 显著富集核糖体、蛋白复合体、DNA 复制相关条目与通路,说明苗期发育转换过程中光合、蛋白合成、DNA 复制等代谢通路发生剧烈重塑,参与花青素动态调控。




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4. 花青素合成相关结构基因与调控转录因子鉴定

从差异基因中筛选 10 个花青素合成结构基因,4 个 PAL 家族基因在 S2 上调,CHS、F3H、F3’H、DFR、ANS 等 6 个下游合成基因均在 S2 下调;从 130 个 MYB/bHLH/WD40 转录因子中经进化树筛选得到 1 个 MYB、3 个 bHLH 候选调控基因,推测下调的 bHLH 是花青素合成关键正向调控因子。


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5. 随机差异基因 qPCR 验证转录组可靠性

随机选取 8 个差异基因开展 qPCR,所有基因上下调趋势与转录组测序结果完全一致,部分基因两时期表达差异显著;qPCR 与 RNA-seq 表达量相关性 R²=0.9065,证明转录组数据真实可信。



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6. 花青素合成候选基因 qPCR 验证

对 10 个结构基因、4 个调控基因进行 qRT-PCR 验证,仅 3 个基因因表达量过低无法检测,其余基因表达趋势均与转录组匹配,5 个基因表达差异达显著水平,进一步确认筛选得到的基因为花青素合成关键候选基因。






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结论

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该研究以紫叶旱地稻 17SM-19 为材料对比一叶期和二叶期,发现幼苗叶片紫色变淡是花青素含量大幅下降导致;转录组测序筛选出近万个差异基因,富集到光合作用、核糖体等相关通路,从中鉴定出 10 个花青素合成结构基因和 4 个调控基因,qPCR 验证了测序数据和候选基因的可靠性,明确了水稻苗期花青素积累随生长减弱的分子特征,为水稻花青素相关分子育种提供关键基因资源与理论支撑。



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