蛋白胶点、胶条鉴定是对SDS-PAGE胶中切下来的蛋白胶条进行鉴定。胶点、胶条中的蛋白可以是已知蛋白也可以是未知蛋白。利用LC-MS/MS蛋白鉴定技术对胶点、胶条样本(即SDS-PAGE样本)、IP、Co-IP、PμLl-down、纯化溶液等复杂样本进行蛋白鉴定。
应用方向:
目标蛋白的鉴定,相互作用蛋白条带的鉴定,蛋白混合物鉴定。检测物种已完成全基因组测序、转录组测序或已知目标蛋白的序列。
检测流程:
送样要求:
实验类型 | 送样建议 |
胶点胶条 | 送考马斯亮蓝染色或银染后的胶点/胶条,要求条带清晰,无降解,面积1cm2。 |
互相作用谱(IP/Co-IP/PμLl-down) | 方案一:IP/Co-IP/PμLl-down的蛋白洗脱液,跑SDS-PAGE胶后,进行染色(建议考染)。将整个泳道按照轻重链切成五份,轻链重链合并为一个样本,剩下的三个样本作为独立样本,此方案鉴定到目标蛋白的概率最高。 |
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